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                        ELISA檢測試劑盒的抗體免疫學(xué)反應檢測
                        更新時(shí)間:2016-12-20 點(diǎn)擊次數:1779

                           現在已有多種自動(dòng)化儀器用于微量反應板型的ELISA檢測試劑盒,包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟,對操作的標準化極為有利。良好的elisa試劑盒板應該是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之間和同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于配料的不同和制作工藝的差別,各種產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大。因此每一批號的聚苯乙烯制品在使用前須檢查其性能。常用的檢查方法為:以一定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被ELISA板各孔后,每孔內加入適當稀釋的酶標抗人IgG抗體,保溫后洗滌,加底物顯色,終止酶反應后分別測每孔溶液的吸光度??刂品磻獥l件,使各讀數在0.8左右。計算所有讀數的平均值。


                          所有單個(gè)讀數與平均讀數之差應小于10%.與聚苯乙烯類(lèi)似的塑料為聚氯乙烯。作為ELISA固相載體,聚氯乙烯板的特點(diǎn)為質(zhì)軟板薄,可切割,價(jià)廉、但光潔度不如聚苯乙烯板。聚氯乙烯對蛋白質(zhì)的吸附性能比聚苯乙烯高,但空白值有時(shí)也略高。免疫熒光技術(shù)雖已廣泛應用于免疫學(xué)的研究與診斷,但是熒光抗體染色標本不能長(cháng)期保存,對組織細胞的細微結構分辨不清,免疫酶技術(shù)則能克服上述不足,標記免疫酶技術(shù)的敏感性更優(yōu)于免疫熒光法,ELISA檢測試劑盒對石蠟切片標本尤為適用,為免疫病理研究開(kāi)辟了一條新途徑,酶顯色產(chǎn)物具有較高的電子密度,經(jīng)過(guò)適當處理還可以進(jìn)行免疫電鏡觀(guān)察,免疫酶組化技術(shù)分為酶標記法與非標記抗體技術(shù),前者是將酶通過(guò)交聯(lián)劑結合在抗體分子上,形成酶標記抗體。后者是將酶作為抗原與相應的特異性抗體連接進(jìn)行的免疫反應,稱(chēng)為非標記抗體酶技術(shù)。


                           免疫酶技術(shù)利用酶催化底物反應的生物放大作用,提高特異性抗原-敏感性的一種標記免疫技術(shù)。該技術(shù)所用的酶要求純度高、催化反應的轉化率高、專(zhuān)一性強、性質(zhì)穩定、來(lái)源豐富、價(jià)格不貴、ELISA檢測試劑盒制備成的酶標抗體或抗原性質(zhì)穩定,繼續保留著(zhù)它的活性部分和催化能力。在受檢標本中不存在與標記酶相同的酶。另外它的相應底物應易于制備和保存,價(jià)格低廉,有色產(chǎn)物易于測定,光吸收高。

                                                   

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